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分光光度計(jì)法測農(nóng)藥殘留的優(yōu)點(diǎn)
更新時(shí)間:2019-03-19 點(diǎn)擊次數(shù):8047

農(nóng)藥殘留的檢測在紫外可見分光光度計(jì)、分光光度計(jì)檢測方面,已經(jīng)取得了很大進(jìn)步,紫外可見分光光度計(jì)靈敏度的提高,穩(wěn)定性的提高給予農(nóng)藥殘留的檢測能力、檢測限、覆蓋范圍等帶來了非常大的提升。(如雙光束紫外可見分光光度計(jì)UV1901PC)具備雙光束光學(xué)系統(tǒng),參比和樣品可同時(shí)放入,提高了分析效率和準(zhǔn)確性。有利于加強(qiáng)農(nóng)藥殘留監(jiān)控力度。同時(shí)UV1901PC雙光束紫外可見分光光度計(jì)具備單機(jī)掃描(隨開機(jī),隨掃描),自動繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(一種殘留元素,只需做一次標(biāo)準(zhǔn)曲線,可儲存于紫外可見分光光度計(jì)本機(jī)中,使用時(shí)調(diào)出。方便實(shí)用),單機(jī)多波長(一個(gè)樣品同時(shí)測出不同波長的數(shù)值。減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間和操作步驟),動力學(xué)等功能(觀察樣品時(shí)間上的變化,可長達(dá)10個(gè)小時(shí))。

 本方法適用于蔬菜、水果、相應(yīng)食物、水及中毒殘留物中有機(jī)類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的檢測。

一定條件中,氨基甲酸酯類農(nóng)藥、有機(jī)磷對膽堿酯酶有抑制作用,抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正比。用分光光度計(jì)測農(nóng)殘的方法其實(shí)是利用酶催化乙酰膽堿水解產(chǎn)物與顯色劑生成黃色物質(zhì),其物質(zhì)在紫外412nm波長處有吸收,可以利用紫外可見分光光度計(jì)測定其吸光度隨時(shí)間的變化值(使用UV1901PC紫外可見分光光度計(jì)動力學(xué)功能操作簡便)得出蔬菜中含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)殘留量的情況。

 

主要儀器:

分光光度計(jì)/紫外可見分光光度計(jì),電子天平,移液槍及配套管嘴,冰箱,超聲波提取儀/萃取儀/處理器(FS-600N)

試劑

PH8.0緩沖溶液  分別稱取11.9g無水磷酸氫二鉀和3.2g磷酸二氫鉀,溶解于1000ml蒸餾水中。

顯色劑    分別稱取160mg5,5-二硫代2-(硝基苯甲酸)(DTNB)15.6mg碳酸氫鈉,溶解于20ml緩沖溶液中,4℃冰箱中保存。

底物   稱取125mg碘化硫代丁酰膽堿,溶解于15ml緩沖液中,搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆?。保存期不超過兩周。

丁/乙酰膽堿酯酶 根據(jù)酶的活性情況,用緩沖液溶解,3min內(nèi)的吸光度變化控制在0.4~0.8。搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

操作步驟

樣品處理  選取有代表性的蔬菜樣品,沖洗掉表明泥土,剪成1cm左右見方碎片,取樣品1g,放入燒杯或提取瓶中,加入5ml緩沖溶液,手搖振蕩1~2Min,或超聲波振蕩30s,浸出提取液,靜置3~5min,待用。

對照溶液測試  先于試管中加入50ul酶液和50ul顯色劑,再加入2.5ml緩沖溶液,搖勻后于37℃放置15min,加入50ul底物搖勻,此時(shí)開始反應(yīng)并顯色,要立即放入分光光度計(jì)/紫外可見分光光度計(jì)自動聯(lián)樣品池中,記錄反應(yīng)3min時(shí)的吸光度。

樣品溶液測試  先于試管中加入50ul酶液和50ul顯色劑,再加入2.5mL樣品提取液,其他操作與對照溶液測試相同,記錄反應(yīng)3min的吸光度變化值。

分光光度計(jì)法測農(nóng)藥殘留主要優(yōu)點(diǎn):穩(wěn)定性好,靈敏性高。

 

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